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一、產品用途：
嘔吐毒素（DON）免疫層析親和柱可選擇性吸附樣品提取液中的嘔吐毒素，從而對樣品液中的嘔吐毒素起到非常針對性的純化作用，過柱純化后的樣品液純度被提高，可用于不同分析方法的測定。
二、產品概述：
嘔吐毒素主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物，也污染糧食制品，人和動物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產生廣泛的毒性效應。它還常與其它的霉菌毒素如黃曲霉毒素共同污染農作物，進入人體后可以相互影響，對人類及動物的健康構成威脅。DON屬于劇毒或中等毒物，在體內可能有一定的蓄積，但無特殊的靶器官，具有很強的細胞毒性。
三、反應原理：
嘔吐毒素（DON）免疫層析親和柱測定的原理是抗原、抗體反應，抗體連接在柱體內，樣品經過提取、過濾后，緩慢的通過脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和柱，在免疫親和柱內毒素與抗體結合，之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他無關物質。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇，經氮氣吹干復溶后注入到分析儀器中用于檢測。
四、產品包裝組成：
每盒中包含25支黃曲霉毒素B1免疫親和柱及1套相應說明書。
五、IAC性能：
1、性能參數
柱容量 | 2000ng |
嘔吐毒素 | >90% ±5% |
2、交叉反應率
嘔吐毒素 | 100% |
玉米赤霉烯醇 | 1% |
六、注意事項：
1、嘔吐毒素可致癌，應戴手套口罩等防護工具操作。
2、使用過的玻璃容器及黃曲霉毒素溶液用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
3、不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
4、免疫親和柱不使用時要2-8℃保存，不可凍存。
5、使用前，免疫親和柱需回至室溫（22-25℃）。
6、取樣量：根據實際情況可以適當增減，但不可太少，同時提取液體積要按比例隨之改變。
7、pH：上柱液pH要在6~8之間，若偏離此范圍需用鹽酸或氫氧化鈉調節pH。
七、需要的材料但盒中不提供：
設備 | 器皿耗材 | 試劑 |
HPLC 泵流操作架 高速均質器高速粉碎機 | 量筒（50/200mL） 漏斗 收集瓶 容量瓶(100mL/1L) 微量移液器：單道 定量濾紙 玻璃微纖維濾紙 離心管(50mL) | 色譜級甲醇 蒸餾水 乙腈 DON標準品 |
八、試劑配制：
1、磷酸鹽緩沖溶液（以下簡稱PBS）：稱取8.00g氯化鈉，1.20g磷酸氫二鈉，0.20g磷酸二氫鉀，0.20gkcl，用900mL蒸餾水溶解，然后用鹽酸調節pH值至7.4，后用蒸餾水稀釋定容至1000mL。
2、乙腈-水（8+2）：取800mL 乙腈，加入200mL 去離子水。
九、樣品處理：真菌毒素分析的大誤差來源是樣品的收集和取樣過程，所以要保證樣品收集和取樣的代表性。
（一）玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補料等吸水性較小的樣本（稀釋倍數：2倍）
1、5g±0.01g 樣品（固體樣品需粉碎，并過1mm 分樣篩），20mL 水；
2、高速均質1min，或用搖床200r/min～300r/min 劇烈振蕩20min；
3、5000r/min離心10min，取上清液備用；
4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
（二）麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強的樣本（稀釋倍數：2倍）
1、4g±0.01g 樣品（固體樣品需粉碎，并過1mm 分樣篩），40mL 水；
2、高速均質1min，或用搖床200r/min～300r/min 劇烈振蕩20min；
3、5000r/min離心10min，取上清液備用；
4、取10mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
（三）醬油、食醋、醬及醬制品（稀釋倍數：2倍）
1、稱取樣品5g(準確到0.1g)，用水定容至20mL，混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中超聲或振蕩20min。
3、5000r/min離心10min，取上清液備用；
4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
（四）酒類（稀釋倍數：2倍）
1、取酒樣5g(準確到0.1g)，加入1g 聚乙二醇，用水定容至20mL，混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中超聲或振蕩20min；
3、5000r/min離心10min，取上清液備用；
4、取4mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
（五）嬰幼兒米粉（稀釋倍數：2倍）
1、5g±0.01g 樣品，加入20mL 乙腈-水（8+2）；
2、高速均質1min，或用搖床200r/min～300r/min劇烈振蕩20min；
3、5000r/min離心10min，取上清液備用；
4、取5mL 混勻后的液體，加入30mL PBS 緩沖液，混勻；
5、取24mL 上樣液過免疫親和柱凈化。
十、操作程序：符合國標GB 5009.111-2016
1、連接:將免疫親和柱后蓋取下，用剪刀剪開，重
新蓋上，連接于泵流操作架的30mL注射器下；
2、上樣:移取上述提取液移至注射器內，打開下端堵頭；
3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接，調節壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱，建議重力過柱；
4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗，棄去全部流出液，并使2-3mL空氣通過柱體；
5、洗脫: 待液體排干后，上樣1mL 甲醇，流速1 滴/秒，收集洗脫液，并在50～60℃加熱條件下N2 氣吹干，然后用1mL 流動相復溶；-復溶液用0.22μm 微孔濾器過濾后轉移至樣品瓶中用于HPLC或LC-MS 等儀器分析。
十一、操作流程圖示
A | B | C | D | E | |||
|
針筒注射器
提取液
過柱 |
|
泵流加壓 |
|
|
色譜甲醇
|
HPLC
|
產品信息：
產品名稱：嘔吐毒素免疫親和柱
產品貨號：LD-003
產品描述：嘔吐毒素單克隆抗體
包裝單位：25支/盒
儲存條件：2～8℃，切勿冷凍
保質期：18個月
本公司可提供的真菌毒素檢測產品
類型 | 產品名稱 |
ELISA酶聯 免疫試劑盒 | 黃曲霉毒素總量（AFT） |
黃曲霉毒素B1（AFB1） | |
黃曲霉毒素M1（AFM1） | |
嘔吐毒素（DON） | |
玉米赤霉烯酮（ZEN） | |
伏馬毒素（FUM） | |
T-2毒素（T-2） | |
赭曲霉毒素（OTA） | |
免疫親和柱 | 黃曲霉毒素總量（AFT） |
黃曲霉毒素B1（AFB1） | |
黃曲霉毒素M1（AFM1） | |
嘔吐毒素（DON） | |
玉米赤霉烯酮（ZEN） | |
伏馬毒素（FUM） | |
T-2毒素（T-2） | |
赭曲霉毒素（OTA） | |
真菌毒素三合一（B1、ZEN、DON）免疫親和柱 | |
可定制多毒素復合免疫親和柱 | |
膠體金快速 檢測卡 | 黃曲霉毒素總量（AFT） |
黃曲霉毒素B1（AFB1） | |
黃曲霉毒素M1（AFM1） | |
嘔吐毒素（DON） | |
玉米赤霉烯酮（ZEN） | |
伏馬毒素（FUM） | |
T-2毒素（T-2） | |
赭曲霉毒素（OTA） |
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